吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）是能够催化T细胞增殖所必需的氨基酸－－色氨酸分解代谢的第一种酶且是限速酶。它在与母胎免疫耐受、肿瘤免疫、自身免疫和感染相关的免疫抑制中起重要作用。异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后出现急性移植物抗宿主病（aGVHD），供体T细胞被激活导致组织损伤。研究证明IDO通过其免疫抑制功能参与aGVHD的发生。作者既往的研究也证实血浆IDO水平与aGVHD严重程度相关。增加的IDO表达可作为aGVHD的一种保护性分子。然而，IDO的精确调控机制尚不清楚。MicroRNAs（miRNAs）是一类通过翻译抑制或诱导mRNA分解负调控基因表达的非编码小RNA。最近，已有报道称循环miRNAs是各种疾病的一种有前景的生物标志物。
赵晓甦1， 黄晓军1， 万峻2， 吕萌1， 刘兰平1， 张晓辉1， 黄晓军1
1北京大学人民医院 北京大学血液病研究所 造血干细胞移植北京市重点实验室
2深圳 北京大学香港科技大学医学中心生物医学研究所
吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）是能够催化T细胞增殖所必需的氨基酸－－色氨酸分解代谢的第一种酶且是限速酶。它在与母胎免疫耐受、肿瘤免疫、自身免疫和感染相关的免疫抑制中起重要作用。异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后出现急性移植物抗宿主病（aGVHD），供体T细胞被激活导致组织损伤。研究证明IDO通过其免疫抑制功能参与aGVHD的发生。作者既往的研究也证实血浆IDO水平与aGVHD严重程度相关。增加的IDO表达可作为aGVHD的一种保护性分子。然而，IDO的精确调控机制尚不清楚。MicroRNAs（miRNAs）是一类通过翻译抑制或诱导mRNA分解负调控基因表达的非编码小RNA。最近，已有报道称循环miRNAs是各种疾病的一种有前景的生物标志物。
本研究旨在找出对IDO具有潜在调控作用的miRNA，并研究血浆miRNA的表达与aGVHD之间的相关性。
通过使用TargetScan、Miranda和DIANA-microT进行生物信息学分析鉴定识别潜在调节IDO的miRNA。采用Western印迹法和荧光素酶检测确认目标miRNA对IDO蛋白质和基因的调节功能。在接受allo-HSCT的25例患者移植的第7天、第14天、第21天、第30天、第45天、第90天以及发生aGVHD时前瞻性采集其血浆，并采用实时定量PCR（RQ-PCR）分析测量移植后不同时间点血浆中miRNA的表达。进行受者操作特征（ROC）分析确定预测aGVHD发生的最佳截断值。
通过生物信息学分析发现，miRNA-586是推定的调节IDO的miRNA。当miRNA-586转染干扰素-γ处理的Hela细胞时，细胞内IDO蛋白减少，然而IDO的mRNA表达却未受明显影响。对293T细胞的荧光素酶检测显示，miRNA-586能直接绑定在IDO基因启动子区，影响其转录。但是，当潜在的结合位点发生变异时，此现象未能被观察到。接受allo-HSCT的25例患者中，10例发生aGVHD，15例未发生。基于这些患者各设定时间点的miRNA-586的表达水平，作者发现移植后第7天的miRNA-586水平在这两组患者有显著差异（P=0.001）。ROC分析结果显示miRNA-586水平高于4.5x104copies/ul更容易发生aGVHD（AUC=0.898，P<0.001）。
研究表明miRNA-586可能通过下调IDO参与aGVHD的发生，并可能成为新的aGVHD治疗方法的一个推定目标。allo-HSCT后第7天时的血浆miRNA-586水平将是预测aGVHD发生的一个很好的生物标志物。
（来源：《肿瘤瞭望》编辑部）
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